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壳寡糖含量测定
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壳寡糖经浓盐酸水解生成盐酸氨基葡萄糖，根据盐酸氨基葡萄糖在流动相和固定相之间具有不同的分配系数，将水解后的试样注入液相色谱，用乙腈/水做流动相，目标物流出后，经蒸发光散射检测器检测，用外标法定量测定
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壳寡糖含量测定：高效液相法
1 原理
壳寡糖经浓盐酸水解生成盐酸氨基葡萄糖，根据盐酸氨基葡萄糖在流动相和固定相之间具有不同的分配系数，将水解后的试样注入液相色谱，用乙腈/水做流动相，目标物流出后，经蒸发光散射检测器检测，用外标法定量测定。
2 仪器和设备原理
除实验室常用仪器和设备外还需：
2.1 高效液相色谱仪：带蒸发光散射检测器和HILIC柱(4.6mm×250mm Shodex Asahipak NH2P-50 4E或同等分析效果的分离柱)。
3 试剂和溶液
3.1 盐酸溶液：12mol/L
4 操作方法
4.1 样品处理
准确称取试样0.1g（精确至0.0002g）于水解管中，加入4mL盐酸溶液，于100℃水解2 h，冷却，然后转移至50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，备用。
4.2 色谱条件
采用乙腈/水(75/25)为流动相，流速为1.0mL/min，柱温30℃，待仪器基线平稳后再进样。
4.3 标准曲线的绘制
分别称取0.015g、0.050g、0.120g、0.260g、0.400g干燥恒重的盐酸氨基葡萄糖(105℃)，按“4.3.1.4.1”项下方法处理，用水定容到刻度，得到盐酸氨基葡萄糖分别为0.3mg/mL、1mg/mL、1.2mg/mL、5.2mg/mL、8mg/mL的标准溶液。在色谱条件(4.2)下准确进样4µL，得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程，绘制标准曲线。
4.4 试样的含量测定
在相同色谱条件下，将处理后的试样溶液(4.1)注入色谱仪中，记录色谱峰的保留时间和峰面积。用盐酸氨基葡萄糖标准溶液的色谱峰保留时间定性，用盐酸氨基葡萄糖标准溶液色谱峰的峰面积来定量。
4.5 结果计算
壳寡糖的质量分数w1按公式(1)计算：
m1×10－3
w1= —————— ×a×100 ……………….………………… （1）
m
式中：
m1 —由工作曲线查得的盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克(mg)；
m —试样的质量，单位为克(g)；
a－盐酸氨基葡萄糖折算为样品对应的氨基葡萄糖盐的系数。
4.6 允许误差
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。
壳寡糖,氨基葡萄糖
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